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        臨床使用常見問題解答

        臨床使用常見問題解答

        • 分類:產品知識
        • 作者:
        • 來源:
        • 發布時間:2021-12-03
        • 訪問量:0

        【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
        答:試劑溫度過低,在反應室內易發生冷凝集,從而影響結果的準確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。

        臨床使用常見問題解答

        【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
        答:試劑溫度過低,在反應室內易發生冷凝集,從而影響結果的準確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。

        • 分類:產品知識
        • 作者:
        • 來源:
        • 發布時間:2021-12-03
        • 訪問量:0
        詳情
        一、試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
        答:試劑溫度過低,在反應室內易發生冷凝集,從而影響結果的準確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。
         
        二、凝膠卡存放的適宜條件?
        答:溫度:18-25度保存; 避免陽光直射。
         
        三、為什么凝膠卡做抗人球實驗可免除洗滌?
        答:因為RBC的密度遠大于血清中的球蛋白,在給定的離心條件下,當離心時,RBC的沉降速率遠大于球蛋白,故RBC首先和凝膠中的抗人球蛋白反應,而不受血清中的球蛋白干擾,從而可免除洗滌這一步驟。
         
        四、為什么用凝膠卡要先加細胞后加血清?
        答:因為加細胞的量要比加血清的量大,先加細胞,可以在反應腔內形成大而充分的反應界面,與后加入的血清反應效果良好。
         
        五、鐮刀形紅細胞貧血病人在做血型配血時易出現假陽性,為什么? 
        答:正常的紅細胞有一定的變形性,可以通過小于其直徑的凝膠間隙,而鐮形紅細胞貧血的病人紅細胞變形能力降低,剛性增大,不能透過凝膠間隙,故出現假陽性。
         
        六、嚴重感染的病人易出現假陽性,為什么? 
        答:病人血清或血漿中的白細胞過多,堵塞了凝膠間隙,從而影響了紅細胞的沉降,造成假陽性。
         
        七、除第五、第六外微柱凝膠假陽性和假陰性反應常見原因
        1. 假陽性反應可見于:
        (1)未完全去除纖維蛋白原的血清標本,殘存纖維蛋白原在凝膠中成為纖維蛋白,阻礙紅細胞沉淀而浮于膠中或膠表面。
        (2)被檢標本染菌也使紅細胞浮于膠中或膠表面。
        (3)被檢紅細胞破碎,常見是因為紅細胞陳舊,此時即使應該是陰性結果,這是因為離心時微柱管離心力方向和該微管軸方向不一致,本應為陰性的結果的沉淀位置偏離,而擬弱陽性反應。
        (4)離心后紅細胞沉淀在微柱凝膠管底及近底部一側,而不是在管底尖部。此為離心時微柱管離心力方向和該微管軸向方向不一致,本應為陰性結果的沉淀位置偏離而呈擬弱陽性反應。
        (5)實驗室溫度低時,因凝膠顆?;顒有詼p少,單個紅細胞穿過時困難,易出現假陽性結果。
        2. 假陰性反應。
        (1)抗原或抗體過少、過弱。
        (2)抗原、抗體比例不合適,如前帶或后帶的現象。
        (3)離心力過大,使弱陽性成為陰性格局。
         
        八、溶血反應現象有哪些原因及臨床意義
        1. 實驗操作者錯誤或實驗標本有問題
        發生溶血反應不一定就是抗原抗體特異性反應所致,可能的原因有:
        (1)反應液是低滲透壓溶液;
        (2)受過熱或過冷溫度影響;
        (3)紅細胞或抗體被細菌等污染;
        (4)其他使紅細胞破壞的物理、化學因素。
        2. 可能是因為紅細胞抗原抗體溶血性反應
        (1)紅細胞抗原與特異性抗體結合,激活補體,作用于紅細胞膜,使之破裂,發生溶血。
        (2)紅細胞抗原與特異性抗體結合,未激活補體,但因受到血清中其他因子作用而溶血。
        3. 溶血的臨床意義
        一定不能將溶血標本認定是陰性反應,一定要將其記錄為溶血反應,不要記錄為陽性反應,更不能記錄為陰性反應。而且要高度警惕:
        (1)發生溶血標本所相應的血液中可能存在陽性的紅細胞抗原抗體反應,對患者極有可能有危險,即可能是受供者血型不相容所致,此時抗體應明確為臨床有意義抗體。
        (2)也極可能是在工作中那個步驟發生了錯誤。因此,一定不要輸用其標本已發生溶血的血液。首先要取新的一份血液,取其標本,應用傳統試管血凝法和微柱凝膠方法同時對比檢測,選擇相容的血液進行輸血;一定要在短期內繼續查找此次溶血的原因。
         
        九、什么是IgG不完全抗體的Coombs試驗?
        人 紅細胞表面抗原與不完全抗體結合(常是IgG類抗體),即不完全抗體致敏紅細胞,由于該不完全抗體分子量小或和其兩個Fab段擴張角度小,不能使相鄰紅細 胞橋聯,紅細胞仍是分散狀況,不出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。在反應體系中,加入針對該抗體的抗體,即抗抗體,該抗抗體Fab段結合紅細胞上不完全抗體 Fc段,出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。
         
        十、什么是Coombs試驗的應用
        1. 直接抗人球蛋白試驗;
        (1)對新生兒溶血?。℉DN)胎兒(嬰兒)紅細胞檢測;
        (2)輸血反應;
        (3)其他溶血性疾??;
        2. 間接抗人球蛋白試驗;
        (1)檢測體內不規則抗體;
        ① 妊娠婦女;
        ② 獻血者;
        ③ 受血者或有過輸血史的人;
        (2)交叉配血試驗;
        (3)對已發現抗體鑒定;
        (4)對一些血型抗原的檢測,如D弱型,Kell 、Duffy 、Kidd和其他血型檢測。
         
        十一、什么是完全抗體和不完全抗體?
        在 適當的介質(液體、凝膠等)中,能夠與相應特異性抗原出現肉眼可見的免疫反應(凝集反應、沉淀反應或溶血反應)的抗體,稱之完全抗體;在適當介質中,不能 出現肉眼可見的免疫反應的抗體被稱之不完全抗體。IgM類抗體一般是完全抗體,IgG類抗體一般是不完全抗體,但IgG類抗體并不都是不完全抗體,一些 IgG抗體與其特異性紅細胞抗原結合,也出現肉眼可見的凝血反應或溶血反應。完全抗體和不完全抗體分類一般指抗體的免疫反應性質,即以能否出現肉眼可見免 疫反應而區分。
         
        十二、什么是規則抗體和不規則抗體?
        人 體內產生的抗體一般都是外來的自身體內部存在的抗原所免疫,產生的抗體,稱之為規則抗體。人體內抗體的特異性是針對自身體內已有的抗原,該類抗體稱之為不 規則抗體。對ABO血型,A型人只有抗B,B型人只有抗A,O型人有抗A,B,AB型人沒有抗A和抗B,這些抗體為規則抗體;如果A型人有抗A,B型人有 抗B,AB型人出現抗A或和抗B,血型血清學確定的ABO血型,如抗原弱表達的Ax型人,這些抗體為不規則抗體。D表性陽性人體內出現的抗D抗體,抗體如 果經研究確定了該抗體是針對該人紅細胞表面所缺乏的D抗原表位(該D陽性紅細胞是D抗原表位部分缺失型)則該抗D是規則抗體。應強調,只有在免疫遺傳學, 在抗原分子水平已經確定了是D抗原表位部分缺失型所產生的抗D之時,將該抗體,明確為規則抗體,但是在臨床上發出D抗原表型陽性人出現抗D在對其詳細深入 研究之前,首先將其作為不規則抗體。
        規則抗體和不規則抗體分類的根據是免疫遺傳學基本理論,即抗體產生的一般規則。
         
        十三、什么是意外抗體和非意外抗體?
        1. 在 臨床血型血清學工作中發現的ABO血型不規則抗體,D表性陽性人體內出現的抗D抗體(不論是否已經確定其是D抗原表位不完全型),以及具有獲得型B型紅細 胞的人檢測出的抗A等,都稱之意外抗體。意外抗體包括了在臨床血型血清學檢測中遇到的所有異常的"意外"抗體。反之,正常的,規則抗體均為非意外抗體。
        2. 意外抗體和非意外抗體,分類主要是指臨床血型血清學檢測中遇到的異常、"意外"的抗體或者是正常的規律性抗體。D陰性人血清中檢出抗D抗體,不將其稱為意外抗體,因對D陰性人,應預料到并高度注意血清中可能有抗D抗體。
         
        十四、什么是臨床有意義抗體和無意義抗體?
        ABO 血型、Rh血型不相容輸血或胎母血型不相容妊娠等情況產生的ABO、Rh血型抗體,能夠引起輸血反應或新生兒溶血病,這類抗體都是臨床有意義抗體,凡是在 臨床上能發生同種異體免疫反應,如溶血,血細胞減少等病癥的血型抗體,都是臨床有意義抗體。而對于有些血型系統,如P血型,即使是該血型不相容輸血或妊 娠,可能產生P血型同種異體抗體,但并不發生溶血性反應和新生兒溶血病,此類抗體稱之臨床無意義抗體。臨床無意義抗體,指的是一般規律,在一般情況不產生 同種異體血型免疫反應,但是個別情況,對少數病例可能產生病癥,甚至嚴重的輸血反應或新生兒溶血病,如MN血型。故臨床上不能將這些抗體絕對地稱之臨床有 意義抗體或無意義抗體。
         
        十五、有關Rh試驗的其他問題
         
         
         
        我們將假陽性反應及假陰性反應做進一步說明。
        一、假陽性反應,情況會導致紅細胞定型結果為假陽性??笵為灰色;抗C為粉紅色;抗E為棕色;抗c為暗綠色;抗e為綠色;抗CDE為橘黃色。試 劑中存在意外抗體,針對人群中出現頻率小于1%的抗原的抗體偶爾也會引起假陽性反應。這些抗體發生率低,即使是無輸血也常會有相應的抗體,抗體的混合物并 不罕見,可能是除人紅細胞外的其他抗原刺激產生的。
        二、下面情況可導致紅細胞定型出現假陰性結果。
        (一)誤用錯誤的抗血清或其他一些顏色相近的試劑。
        (二)試管中沒有加抗血清。
        (三)一種特異性血清不能與抗原的某種變異形式反應。例如,抗e血清不一定與黑人中較常見的e抗原變異體反應。較少見的還有抗E血清也可能與EW抗原反應弱或不反應。
        (四)抗血清主要含直接抗順式Rh抗原的抗體。用其檢查帶有獨立基因產生的個體抗原的紅細胞,其結果是不可靠的。較常見的抗C血清,其與R1或r,產生的抗原的反應總比Rz或Ry產生的C抗原反應強。
        (五)沒有遵循試劑使用說明,而不正確地使用抗血清,例如,血清與紅細胞的比例不合算,孵育溫度或孵育時間不正確。
        (六)離心后看結果時過度用力振搖試管,會使紅細胞的弱凝集消失。
        (七)抗血清中免疫球蛋白會因污染、保存不當或過期而變質。尤其是化學修飾的IgG抗體容易被某些蛋白水解酶破壞,而細菌會產生此酶。
        人體紅細胞上還可檢出300多個其他抗原。其中一些存在于其他組織內。系統抗原存在于除成熟紅細胞以外的大多數人體細胞或血小板上。臨床受血者產生抗體。
        幾乎所有人的特定細胞系都有的抗原稱為高頻或“公共”抗原,其他一些稱為“私有”抗原。每個已知抗原都是檢查血清中特異抗體時發現的。供閱讀者參考
        —-江陰力博醫藥生物技術研究所—
        2015.03.25
         

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